蛋白浓缩和换Buffer通常使用的
超滤管，选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
使用前加入MilliQ水，水量*过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。当浓缩到剩下1ml时，取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适:前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至lml左右的时候，轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤)，再浓缩至1ml左右，连续三次，后一
次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，-般不多于500u1，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
取出蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
